ENSILADO DE MAIZ COMO CAUSANTE DE UN BROTE DE LISTERIOSIS EN UNA EXPLOTACIÓN MIXTA OVINA - BOVINA.

Velasco Diego, J.; Fernández Benito, V.

Zootecnia. Laboratorio de Análisis clínicos Veterinarios. C/ Badajoz 12-14. 37003 Salamanca. España.

 

 

RESÚMEN.

Se describe un brote de Listeriosis tras la alimentación durante cuatro días a base de ensilado de maíz en una explotación donde cohabitan un rebaño ovino de raza castellana y otro bovino extensivo de raza avileña y morucha. Dicho brote se caracterizó por la aparición de un cuadro clínico de Neurolisteriosis forma clínica nerviosa (FN) en dos ovejas y un cuadro clínico de aborto,forma clínica abortiva (FA) en el rebaño bovino .

En ambos cuadros clínicos tras realizar la necropsia de un ovino y feto bovino abortado de 7 meses de edad se realizó bacterioscopia y aislamiento (Fig. 1) (Fig. 2), obteniéndose como resultado el aislamiento positivo de Listeria monocitógenes en los casos clínicos . Así mismo resultó positivo también el aislamiento de dicho microorganismo a partir de muestras de ensilado de maíz.

Fig. 1. Bacterioscopia .Tinción de Gram x100. Listeria monocitógenes

Fig. 2. Bacterioscopia de cultivo. Tinción de Gram x100. Listeria monocitógenes

Una vez aislado el microorganismo sospechoso de la etiología de dicha enfermedad, se observó su tipo de colonias, su crecimiento en ambientes aerobios a 37ºC y 4ºC (Refrigeración ) así como su comportamiento en medios de cultivo, y una serie de pruebas laboratoriales a fin de identificarlo como Listeria monocytógenes, agente etiológico de la Listeriosis manifestada en estas dos formas clínicas en dicho brote de enfermedad amén de que presente otras manifestaciones clínicas .

 

INTRODUCCIÓN

La Listeriosis representa a un conjunto de enfermedades causadas por Listerias donde actualmente se reconocen dos Listerias patógenas (L. monocytógenes y L. ivanovii) cursando con cuadros clínicos nerviosos, septicemias, abortos, mortalidad perinatal y mamitis. Es una Zoonosis. Se la denomina como enfermedad del ensilado o torneo.

El agente etiológico que produjo estos dos cuadros clínicos ( Nervioso en ovejas y abortivo en bovinos) es Listeria monocytógenes, pluriespecífica siendo un bacilo Gram positivo regular, corto y regordete no esporulado y acapsulado, móvil y anaerobio facultativo, microaerófilo. Es un germen telúrico, denominándose así a los terrenos donde abundan como terrenos listerógenos.

En el presente trabajo se han estudiado los casos clínicos aparecidos en dicho brote de enfermedad .

Los síntomas clínicos surgen a los cuatro días de ingerir dicha alimentación y en el mismo día aparecen dos ovejas con síntomas clínicos de trastornos de locomoción así como de la masticación con disfagia y sialorrea (Fig. 3).

Fig. 3: Oveja afectada de Neurolisteriosis.

Al día siguiente aparece un aborto bovino de una novilla primeriza gestante en el 7º mes. En el feto, una vez necropsiado la parte que quedaba de él (ya que fue ingerido durante la noche posiblemente por animales silvestres ), se pudo extraer el corazón y pulmones que tras realizar bacterioscopia y aislamiento del contenido del corazón y de los pulmones se pudo apreciar una septicemia fetal. Dicho bovino cursó con metritis y retención placentaria.

Cuatro días después una oveja causó baja y la otra oveja afectada presentaba un aspecto de progresiva caquexia, progresiva parálisis, temperatura de 39.5 ºC postración y postura típica de autoauscultación. La disfagia era evidente, al conservar restos de paja y forraje en cavidad bucal con abundante saliva por la imposibilidad de tragar consecuencia de la parálisis lingual y del nervio trigémino con caída del labio y párpado así como síntomas progresivos de meningoencefalitis.

Se procedió al sacrificio y necropsia de dicha oveja y tras realizar los análisis laboratoriales resultó positivo el aislamiento de Listeria monocytógenes.

La Listeria presenta dos factores de patogenicidad :

- Componentes inhibidores de la función lisosomal (son fagocitados pero no lisados) de forma que viajan protegidos de la inmunidad celular y humoral .

- Beta hemolisina .( Listerolisina O )

Presenta gran facilidad de propagarse vía nerviosa causando la meningoencefalitis.

 

MATERIALES Y METODOS

A partir de las muestras patológicas ( Pulmones y corazón de feto bovino abortado) tras la necropsia se observaron unos pulmones congestivo-hemorrágicos de los cuales se realizó bacterioscopia, y tinción Gram de frotis de parénquima pulmonar y contenido sanguinolento de corazón observándose bacilos cortos regordetes gram positivos de forma regular. Se realizaron siembras por agotamiento de las muestras patológicas en medios de cultivo comunes como es el Agar Sangre de carnero en ambiente aerobio pero a temperaturas de 37ºC y 4 ºC. A las 24-36 horas se obtuvo crecimiento positivo en las placas a 37 ºC, debiendo esperar 6-7 días para obtener crecimiento a temperatura de 4ºC observándose colonias pequeñas casi transparentes blanquecinas, y los bordes rugosos que evidencian una hemólisis estrecha producida por la Beta hemolisina llamada Listerolisina O .

Tras realizar el sacrificio y la necropsia de la oveja, observándose lesiones inespecíficas, con congestión generalizada de vísceras, así como fuerte congestión en SNC (Fig. 4). Se realizó el mismo procedimiento laboratorial seguido con las muestras de feto bovino.

Fig. 4: Sistema Nerviosos Central congestivo.

A partir de muestras de ensilado por su elevada contaminación se procedió al aislamiento previo enriquecimiento en frío, en medios de cultivo de Agar Sangre con 0.05 % de telurito potásico como inhibidor de los Gram negativos y se puso a temperatura de 4ºC.

Resultó ser dicho microorganismo catalasa positivo . Se le realizó además el Test de CAMP consistente en sembrar una estria de Staphilococus aureus y enfrentar a dicho microorganismo de forma que se observó una hemólisis sinérgica entre la B-toxina de Staphilococus aureus y la hemolisina de la Listeria, resultanto Positivo el Test de CAMP.

Se realizó antibiograma resultando sensible a la ampicilina, gentamicina, amoxicilina-clavulánico, y penicilina G; dudoso a la oxitetraciclina; y resistente al florfenicol, cefquinoma y enrofloxacina .

 

CONCLUSIONES

La enfermedad del ensilado como se la denomina es una enfermedad poco frecuente en la ganadería, si bien resulta interesante por ser aún menos frecuente encontrar en un mismo brote de enfermedad la forma clínica nerviosa y abortiva y en dos especies distintas bovino y ovino.

Los aislamientos positivos realizados a partir de muestras de feto bovino, vísceras y SNC de ovino, así como de ensilado,coinciden en la etiología de Listeria, confirmando la clínica manifiesta. A partir de muestras patológicas ( pulmones de feto, y SNC ovino) los aislamientos en Agar Sangre no presentaron mayores dificultades, a excepción del aislamiento a pàrtir del ensilado donde fué necesatrio hacer las oportunas resiembras.

La identificación basada en las pruebas de catalasa positivo, la forma de colonias, el Test de CAMP, su patogenicidad y comportamiento hemolítico en Agar Sangre, dan la confirmación del agente Listeria monocytógenes como causante de este brote de enfermedad en este colectivo cohabitado por especie ovina y bovina.

El antibiograma dio buena sensibilidad in vitro a las penicilinas y aminoglucósidos no así in vivo donde se trató una oveja durante dos días con gentamicina intravenosa y ampicilina intramuscular sin observarse mejoría alguna .

Es conveniente mejorar la calidad del ensilado haciendo su almacenaje adecuado, que no sea sobre tierra y bajo condiciones anaerobias y con una fermentación adecuada de control del pH por debajo de 5.5 ya que superado este pH el crecimiento de Listerias se ve favorecido.

 

BIBLIOGRAFÍA

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• Ernst L. Biberstein y Yuan Chung Zee . Tratado de Microbiología veterinaria. Edit Acribia s.a. Pags. 325-328 ;1994
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• Alberto Delgado Silvia Amich .Laboratorio clínico Microbiología .Interamericana. McGraw-Hill. pags. 64-65. 1994.

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